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摘要:本文探討了基于人工智能(AI)的電穿孔儀控制系統(tǒng)的構(gòu)建與應(yīng)用,詳細(xì)闡述了AI在提升電穿孔儀操作精度、實(shí)驗(yàn)效率及數(shù)據(jù)解析能力方面的價(jià)值。通過(guò)威尼德電穿孔儀與某試劑的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,本研究展示了AI控制下的電穿孔技術(shù)在細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率與細(xì)胞存活率上的顯著提升。研究不僅構(gòu)建了AI與電穿孔技術(shù)的轉(zhuǎn)化體系,還探討了其策略創(chuàng)新與廣闊應(yīng)用前景。引言電穿孔儀作為一種廣泛應(yīng)用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)工具,通過(guò)施加短暫的高壓電場(chǎng)使細(xì)胞膜形成微小孔洞,從而實(shí)現(xiàn)外源基因或分子進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部。然而,傳統(tǒng)電穿孔儀操作復(fù)...
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摘要:本研究利用微流控電穿孔儀實(shí)現(xiàn)了對(duì)單細(xì)胞的精準(zhǔn)基因編輯,通過(guò)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,成功提高了基因編輯效率,為單細(xì)胞水平上的基因功能研究和疾病模型構(gòu)建提供了強(qiáng)有力的工具。本文詳細(xì)闡述了實(shí)驗(yàn)方法、結(jié)果及討論,并展望了該技術(shù)的創(chuàng)新應(yīng)用前景。一、引言基因編輯技術(shù),特別是CRISPR/Cas9系統(tǒng)的出現(xiàn),極大地推動(dòng)了生命科學(xué)領(lǐng)域的研究進(jìn)展。然而,傳統(tǒng)的基因編輯方法通常針對(duì)細(xì)胞群體進(jìn)行操作,難以實(shí)現(xiàn)對(duì)單個(gè)細(xì)胞的精準(zhǔn)編輯。近年來(lái),微流控技術(shù)的發(fā)展為單細(xì)胞操作提供了可能,其中微流控電穿孔儀作為一...
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摘要:本研究聚焦于電穿孔儀電場(chǎng)參數(shù)對(duì)腫瘤不可逆電穿孔(IRE)的影響,通過(guò)一系列實(shí)驗(yàn)優(yōu)化電場(chǎng)強(qiáng)度、脈沖寬度和脈沖次數(shù)等關(guān)鍵參數(shù),以提高腫瘤消融效率并減少正常組織損傷。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,在特定電場(chǎng)參數(shù)下,腫瘤消融效果好,為腫瘤治療提供了一種新的精準(zhǔn)、高效手段。引言腫瘤治療一直是臨床醫(yī)學(xué)的重要挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)治療方式如手術(shù)切除、放療和化療雖有一定療效,但存在諸多局限。手術(shù)切除受限于腫瘤部位和大小,放療易引發(fā)正常組織損傷,化療則因缺乏特異性導(dǎo)致全身性毒副作用。不可逆電穿孔(IRE)作為一種新...
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摘要:本研究旨在構(gòu)建人P2X7基因的真核表達(dá)載體,并通過(guò)轉(zhuǎn)染獲得穩(wěn)定表達(dá)P2X7分子的HEK293細(xì)胞株。以人腦組織P2X7cDNA為模板擴(kuò)增出P2X7基因,插入到真核表達(dá)載體pEGFP-N1中,構(gòu)建重組質(zhì)粒pEGFP-N1/P2X7。通過(guò)G418輔助熒光篩選,成功建立了穩(wěn)定表達(dá)P2X7-EGFP的HEK293細(xì)胞系。該細(xì)胞系的建立為進(jìn)一步研究P2X7離子通道的結(jié)構(gòu)和功能奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。引言P2X7受體是嘌呤能受體家族中的一種重要成員,屬于配體門控離子通道受體。P2X7受體被...
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摘要本文旨在探討電轉(zhuǎn)法(電穿孔法)在修飾的信使核糖核酸(modRNA)細(xì)胞轉(zhuǎn)染中的應(yīng)用效果及相關(guān)特性。通過(guò)優(yōu)化電轉(zhuǎn)參數(shù),實(shí)現(xiàn)了在HEK293和HeLa細(xì)胞系中高效的modRNA轉(zhuǎn)染,并評(píng)估了轉(zhuǎn)染效率、細(xì)胞活力及基因表達(dá)水平。本研究為modRNA在基因功能研究、細(xì)胞治療等領(lǐng)域的進(jìn)一步應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。引言在現(xiàn)代分子生物學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究領(lǐng)域,將外源核酸分子高效地導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)是一項(xiàng)極為關(guān)鍵的技術(shù)手段。其中,modRNA修飾技術(shù)的出現(xiàn)為基因表達(dá)調(diào)控、疾病治療等多方面研究開辟了新的途...
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摘要為了建立穩(wěn)定表達(dá)谷胱甘肽過(guò)氧化物酶6(Glutathioneperoxidase6,GPx6)的真核表達(dá)細(xì)胞系,本研究對(duì)GPx6進(jìn)行基因克隆,構(gòu)建了慢病毒表達(dá)載體,并成功建立了表達(dá)豬源GPx6的CHO-K1細(xì)胞系。該研究成果為GPx6在豬繁殖力提高和精液稀釋液添加劑的應(yīng)用提供了新思路。引言谷胱甘肽過(guò)氧化物酶6(GPx6)作為抗氧化酶家族的重要成員,在生物體內(nèi)具有抗氧化和細(xì)胞保護(hù)的作用。近年來(lái),GPx6在生殖健康領(lǐng)域的研究逐漸增多,尤其是在豬繁殖力提高方面展現(xiàn)出潛在的應(yīng)用價(jià)...
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摘要:本研究旨在探討肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(hepatocytegrowthfactor,HGF)基因通過(guò)腎臟電轉(zhuǎn)染方法對(duì)大鼠腎缺血再灌注損傷(ischemia-reperfusioninjury,IRI)的保護(hù)作用。通過(guò)構(gòu)建hHGF基因表達(dá)載體,并利用威尼德電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)將其導(dǎo)入大鼠腎臟,觀察其對(duì)腎功能、組織學(xué)改變及細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果表明,hHGF基因電轉(zhuǎn)染能有效減輕腎缺血再灌注損傷,為腎保護(hù)提供新的策略。引言腎缺血再灌注損傷是臨床腎臟移植、腎臟部分切除術(shù)及主動(dòng)脈瘤手術(shù)等過(guò)程中的常見...
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摘要本研究旨在探討山羊精子電穿孔轉(zhuǎn)染外源DNA的最適條件,并評(píng)估其對(duì)精子活力和轉(zhuǎn)染效率的影響。通過(guò)優(yōu)化電場(chǎng)強(qiáng)度、電擊時(shí)間和電擊次數(shù)等參數(shù),確定了山羊精子電穿孔轉(zhuǎn)染外源DNA的最佳條件。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,在400V、200μs條件下電擊一次,精子活力和轉(zhuǎn)染效率顯著提高,為生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因山羊奠定了基礎(chǔ)。引言基因轉(zhuǎn)移技術(shù)是現(xiàn)代生物技術(shù)的重要組成部分,尤其在動(dòng)物轉(zhuǎn)基因領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。精子介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移因其操作簡(jiǎn)便、成本低廉而受到廣泛關(guān)注。其中,電穿孔法作為一種高效的物理方法,能夠通過(guò)產(chǎn)生暫...